摘要：實(shí)現(xiàn)海水中麻痹性貝毒的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)有助于厘清毒素的時(shí)空分布特征及遷移轉(zhuǎn)化規(guī)律，為麻痹性貝毒的污染預(yù)警提供科學(xué)依據(jù)。然而，目前常用的檢測(cè)方法僅適用于實(shí)驗(yàn)室分析，不能滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求。針對(duì)這一問(wèn)題，本論文將系統(tǒng)研究基于全固態(tài)離子選擇性電極用于麻痹性貝毒高靈敏快速檢測(cè)的新方法。

通過(guò)選擇合適的固體接觸層材料，構(gòu)建高穩(wěn)定性、高重現(xiàn)性的全固態(tài)離子選擇性電極;采用微電極技術(shù)，構(gòu)建全固態(tài)離子選擇性微電極;通過(guò)合成核酸適配體功能化磁性微球以及引入核酸酶，以全固態(tài)離子選擇性微電極為換能器，實(shí)現(xiàn)麻痹性貝毒的高靈敏快速檢測(cè)。

研究工作的概述如下:

1、基于DAAQ-TFP rGO固體接觸層的全固態(tài)鎘離子選擇性電極本工作提出了一種基于共價(jià)有機(jī)框架石墨烯復(fù)合材料的全固態(tài)離子選擇性電極。該復(fù)合材料由1，3，5-三醛基間苯三酚(TFP)和2，6-二氨基蒽醌(DAAQ)在石墨烯基底上縮合而形成，具有較大的電容和良好的氧化還原活性。

將鎘離子選擇性電極作為研究模型，所制備的電極在1.0×10～7.9×10 mol?L的Cd活度范圍內(nèi)的能斯特響應(yīng)斜率為29.7±0.4 m V/dec，檢出限為6.8×10 mol/L。由于DAAQ-TFP rGO的電容高達(dá)2.0 m F，因此基于DAAQ-TFP rGO的電極在70 h開(kāi)路電位測(cè)試中的電位漂移值僅為1.2±0.2μV/h。此外，制備的電極還具有良好的重現(xiàn)性，同批次電極與不同批次電極間E的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.28 m V(n=4)和0.30 m V(n=4)。電極不受光照和氣體的干擾，并且在固體接觸層和敏感膜之間未出現(xiàn)水層。

2、基于電沉積DAAQ-TFP rGO固體接觸層的全固態(tài)鎘離子選擇性微電極

基于DAAQ-TFP rGO作為固體接觸層時(shí)所表現(xiàn)出的優(yōu)良特性，本工作進(jìn)一步通過(guò)電沉積的方式，在直徑約50μm的金微電極表面沉積了DAAQ-TFP rGO固體接觸層，制備了全固態(tài)鎘離子選擇性微電極。

制備的全固態(tài)鎘離子選擇性微電極具有良好的穩(wěn)定性，其電位漂移值僅為7.5±1.1μV/h。此外，電極在p H=3的鹽酸背景下對(duì)Cd響應(yīng)的能斯特斜率為27.4±0.4 m V/dec，活度范圍為8.7×10 M～7.6×10 mol?L，檢出限低至3.2×10 mol?L。由此可見(jiàn)，所制備的全固態(tài)鎘離子選擇性微電極具有體積小，穩(wěn)定性好，靈敏度高的特點(diǎn)，能夠作為換能元件，為實(shí)現(xiàn)麻痹性貝毒的高靈敏快速檢測(cè)提供技術(shù)支持。

3、基于核酸適配體功能化磁珠與核酸酶的全固態(tài)鎘離子選擇性微電極法

檢測(cè)膝溝藻毒素現(xiàn)階段全固態(tài)離子選擇性電極已用于檢測(cè)麻痹性貝毒，但檢測(cè)方法選擇性差，靈敏度低?；诖耍菊鹿?jié)將高特異性的核酸適配體作為識(shí)別分子，構(gòu)建了Cd S標(biāo)記的核酸適配體功能化磁珠，并引入核酸酶輔助放大策略，以上章節(jié)中構(gòu)建的高靈敏全固態(tài)鎘離子選擇性微電極為換能元件，實(shí)現(xiàn)麻痹性貝毒的高靈敏快速檢測(cè)。

以膝溝藻毒素1/4為例，最優(yōu)條件下，該檢測(cè)體系對(duì)膝溝藻毒素1/4檢測(cè)的線性范圍為10～100pmol?L，檢出限為4.09 pmol?L。此方法具有普適性，通過(guò)使用相對(duì)應(yīng)的核酸適配體有望實(shí)現(xiàn)其它麻痹性貝毒的檢測(cè)。